Fluorescencia aplicada a la virología

SARS-CoV dedican una porción significativa de su genoma a la producción de proteínas no estructurales necesarias para la replicación viral.

• Baric y sus colaboradores, emplearon un Fluoromax de HORIBA para la medición cuantitativa de las afinidades de unión entre el ARN y proteína no estructural 9 (nsp9)
  Ref.: DOI: 10.1128/JVI.01505-08

La patente implica compuestos de semicarbazona, los cuales son inhibidores de Cisteína-proteasa.

• Las Cisteína-proteasas están involucradas en cánceres, enfermedades inflamatorias e infección por SARS-CoV. La actividad de la proteasa en presencia de inhibidores fue monitoreada por Fluorescencia usando el Fluoromax
  Ref.: https://patentimages.storage.googleapiscom/31/43/49/4a224bbb5f0855/US8173696.pdf

La Amplificación Basada en la Secuencia de Ácido Nucleico (NASBA) ha proporcionado una alternativa a la técnica PCR para la amplificación del ARN.

• Se utiliza habitualmente en el diagnóstico clínico de muchos virus de ARN monocatenarios, incluidos la Influenza A, la Fiebre Aftosa, Síndrome Respiratorio Agudo (SARS), Coronavirus, Virus del Nilo Occidental, Bocavirus Humano (HBoV), y el más importante, el VIH.
• El rediseño de los oligonucleótidos evitan la formación de dímeros inhibidores eliminando los falsos positivos y obteniendo resultados reales. Ref.: https://link.springer.com/article/10.1007/s40291-013-0029-4#Abs1

APLICACIONES

• SARS-CoV: Medición cuantitativa de la afinidad de unión entre el ARN y proteínas no estructurales
• Detección de Anticuerpos: Uso de puntos cuánticos para pruebas de inmunoensayo
• Hepatitis C: Marcador fluorescente para identificación de vírus
• Inhibidores de Cisteína-proteasas (SARS-CoV): Actividad de la proteasa en la presencia de inhibidores
• Diagnóstico clínico: La Amplificación Basada en la Secuencia de Ácido Nucleico (NASBA) ha proporcionado una alternativa atractiva para diagnóstico de la Influenza A, la fiebre aftosa, Síndrome Respiratorio Agudo (SARS), Coronavirus, Virus del Nilo Occidental, Bocavirus Humano (HBoV), y el más importante, el VIH.
• Inhibidor de la replicación viral: Estudios en relicación de inhibidores del Coronavirus por SARS usando FRET
• Actividad mutagénica: Estudio de la actividad mutagénica de la Amilorida (medicamento para la hipertensión) en virus ARN