Un nuevo concepto de espectrómetro que redefine el futuro del análisis de fluorescencia
Espectrómetro de fluorescencia y absorbancia simultaneos: dos equipos en uno
Rango de longitud de onda de detección de fluorescencia UV-Vis-NIR de 250 a 1,100 nm
Adquisición completa de EEM de fluorescencia tridimensional en menos de un segundo
La mejor especificación de sensibilidad de fluorescencia de 6,000: 1 RMS para Water Raman
Corrección automática para efectos de filtro interno primario y secundario (IFE)
Huellas digitales moleculares de alta fidelidad con la exclusiva tecnología A-TEEM ™ (matriz de emisión de excitación de transmisión y excitación)
Detección CCD de milisegundos de todo el espectro de fluorescencia
Fluorescencia y Absorbancia
Duetta puede usarse como un espectrofluorómetro, como un espectrómetro UV-Vis-NIR para medir la absorbancia, o como un instrumento que mide huellas moleculares, que requieren la adquisición de fluorescencia y absorbancia, corrigiendo IFE en tiempo real.
Los dos detectores de muestras especializados de Duetta recogen fluorescencia en ángulo recto con la luz de excitación y absorben directamente a través de la muestra.
Espectros de fluorescencia absoluta con corrección de efecto de filtro interno (IFE) en tiempo real
IFE limits the linearity of the fluorescence signal at higher sample concentrations due to primary and secondary re-absorption of fluorescence. Duetta’s unique design applies real time IFE correction to obtain absolute fluorescence spectra at higher sample concentrations.
Rapidez
La tecnología CCD ultrarrápida y avanzada de Duetta le permite superar, por ordenes de magnitud, a cualquier competidor que use PMT. ¡Es el fluorómetro de mesa más rápido del mundo y el único fluorómetro que puede adquirir un espectro completo en menos de 100 milisegundos! Esta tecnología CCD de última generación también extiende la detección de longitud de onda NIR a 1,100 nm, mucho más allá del límite de un fluorómetro PMT estándar.
La detección CCD de Duetta toma una instantánea de todo el espectro de emisión de fluorescencia de 250 a 1,100 nm. (Por lo tanto, no solo es mucho más rápido, sino que también le brinda mucha más información que la competencia).
Las aplicaciones de infrarrojo cercano están creciendo rápidamente, y Duetta está lista para enfrentar el desafío con la detección de fluorescencia de 250 a 1,100 nm, mucho más allá del alcance de los PMT estándar.
Sensibilidad
Tener el nivel más alto de sensibilidad a la fluorescencia significa que el diseño optimizado de Duetta le permite medir concentraciones más bajas de una muestra y proporciona datos de mejor calidad.
Modos de adquisición
Espectrómetro de absorbancia y fluorescencia
Sensibilidad de fluorescencia
Relación señal / ruido de agua Raman> 6,000: 1 RMS, excitación de 350 nm, rendijas de 5 nm
Tasa de adquisición espectral
510,000 nm/min
Tasa de adquisición de EEM
Tan rápido como 1 segundo (muestra y longitud de onda dependiente)
Tasa de adquisición de A-TEEM
Tan rápido como 30 segundos (muestra y longitud de onda dependiente)
Detector de fluorescencia
CCD/Espectrógrafo
Rango del detector de fluorescencia
250 a 1,100 nm
Ancho de banda de fluorescencia
1, 2, 3, 5,10, 20 nm (excitación y emisión)
Fuente de luz
Lámpara de arco de xenón de 75 W. Cartucho dedicado para reemplazo de complemento
Rango de longitud de onda de excitación / absorbancia
250 a 1,000 nm
Detector de absorbancia
Fotodiodo de silicio
Rango del detector de absorbancia
250 a 1,000 nm
Ancho de banda de absorbancia
1, 2, 3, 5,10, 20 nm
Rango de absorbancia
0 a 2 A
Precisión de la absorbancia
+/- 0.02 A
Precisión de longitud de onda
+/- 1 nm
Requerimientos de computadora
Windows® 7/8/10, SO de 64 bits, computadora portátil o PC con al menos 1 USB (más para accesorios adicionales)
Software
EZSpec
Dimensiones (ancho x profundidad x altura)
17 x 20.4 x 14.4 pulgadas; 43,18 x 51,816 x 36,576 cm
Peso
45 libras; 20,4 kg
Polarizadores (momento de compra)
Duetta-Bio
Si (280 a 750 nm)
¿Qué es la espectroscopía de fluorescencia?
Introducción a la espectroscopía de fluorescencia de estado estacionario y tiempo resuelto
El término fluorescencia se refiere a un tipo de luminiscencia. La luminiscencia, ampliamente definida, es la emisión de luz de una molécula.
La fluorescencia, específicamente, es un tipo de fotoluminiscencia donde la luz eleva un electrón a un estado excitado. El estado excitado sufre una rápida pérdida de energía térmica para el medio ambiente a través de vibraciones, y luego se emite un fotón desde el estado excitado singlete más bajo. Este proceso de emisión de fotones compite por otros procesos no radiativos, incluida la transferencia de energía y la pérdida de calor.
Cuando se usa el término «fluorescencia», los mismos métodos de medición pueden aplicarse típicamente a cualquiera de las categorías de luminiscencia anteriores.
¿Qué es un espectro de fluorescencia?
Steady state fluorescence spectra are when molecules, excited by a constant source of light, emit fluorescence, and the emitted photons, or intensity, are detected as a function of wavelength. A fluorescence emission spectrum is when the excitation wavelength is fixed and the emission wavelength is scanned to get a plot of intensity vs. emission wavelength.
Un espectro de excitación de fluorescencia (azul) y un espectro de emisión (púrpura) son imágenes especulares entre sí
Un espectro de excitación de fluorescencia es cuando se fija la longitud de onda de emisión y se escanea la longitud de onda del monocromador de excitación. De esta manera, el espectro proporciona información sobre las longitudes de onda a las que una muestra absorberá para emitir en la longitud de onda de emisión única elegida para la observación. Es análogo al espectro de absorbancia, pero es una técnica mucho más sensible en términos de límites de detección y especificidad molecular. Los espectros de excitación son específicos de una sola longitud de onda emisora / especie en oposición a un espectro de absorbancia, que mide todas las especies absorbentes en una solución o muestra. Los espectros de emisión y excitación para un fluoróforo dado son imágenes especulares entre sí. Típicamente, el espectro de emisión ocurre a longitudes de onda más altas (energía más baja) que el espectro de excitación o absorbancia.
Estos dos tipos espectrales (emisión y excitación) se utilizan para ver cómo está cambiando una muestra. La intensidad espectral y / o la longitud de onda máxima pueden cambiar con variantes como la temperatura, la concentración o las interacciones con otras moléculas a su alrededor. Esto incluye moléculas de desactivación y moléculas o materiales que implican transferencia de energía. Algunos fluoróforos también son sensibles a las propiedades ambientales del disolvente, como el pH, la polaridad y ciertas concentraciones de iones.
¿Qué tipos de moléculas y materiales exhiben fluorescencia?
Fluorescent molecules and materials come in all shapes and sizes. Some are intrinsically fluorescent, such as chlorophyll and the amino acid residue tryptophan (Trp), phenylalanine (Phe) and tyrosine (Tyr). Others are molecules synthesized specifically as stable organic dyes or tags to be added to otherwise non-fluorescent systems. There are entire catalogs of these available. Typically, organic fluorescent molecules have aromatic rings and pi-conjugated electrons in them. Depending on their size and structure, organic dyes can emit from the UV out into the near-IR.
Espectros de emisión de fluorescencia de algunos fluoróforos comunes a través del espectro UV y visible
Aquí hay una muestra aleatoria de algunos fluoróforos comunes que abarcan el rango UV y visible. Algunos elementos de tierras raras, o lantánidos, tienen orbitales electrónicos más altos llenos, donde la transición de electrones debido a las transferencias de carga de ligandos metálicos ocurre entre los orbitales 4f-5d e incluso 4f-4f. (Bunzli, 1989) Hay muchas moléculas que son de naturaleza luminiscente, como algunos de los aminoácidos, clorofilas y pigmentos naturales. Otros están altamente diseñados para usos muy específicos de la espectroscopía de fluorescencia.
Algunas de las categorías de moléculas y materiales fluorescentes son:
Aminoácidos (Trp, Phe, Tyr)
Derivados de pares de bases (2-AP, 3-MI, 6-MI, 6-MAP, pirrolo-C, tC)
Clorofilas
Proteínas Fluorescentes (PF)
Colorantes orgánicos (fluoresceína, rodamina, N-aminocoumarinas y derivados de estos)
Elementos de tierras raras (lantánidos)
Semiconductores
Puntos cuánticos
Nanotubos de carbono de pared simple (SWCNT)
Células solares
Pigmentos, abrillantadores
Fósforos
Mucho mas…
Otras moléculas y materiales como proteínas fluorescentes, semiconductores, fósforos y elementos de tierras raras se encuentran entre las muestras fluorescentes de uso común. Los polímeros con compuestos aromáticos o dienos conjugados también tienen comúnmente propiedades fluorescentes. Por supuesto, se crean nuevos materiales todo el tiempo.
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